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IMPROVEMENT OF TOOLS AND PORTABILITY OF MASS SPECTROMETRY-BASED CLINICAL PROTEOMICS AS APPLIED TO CHRONIC KIDNEY DISEASE

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Detección precoz de la insuficiencia renal crónica

La insuficiencia renal crónica (IRC) se caracteriza por una pérdida progresiva de la actividad renal a lo largo de varios meses o años. El número de personas que padecen esta enfermedad va en aumento en todo el mundo, por lo que resulta importante la detección precoz de individuos en riesgo.

La IRC provoca insuficiencia renal y los pacientes afectados requieren necesariamente una terapia de reemplazo renal, un trasplante o diálisis de por vida. Existen varios tratamientos para la IRC. La mayoría supone inhibir el sistema renina/angiotensina o administrar fármacos antiinflamatorios. En una etapa inicial de la IRC, los tratamientos pueden ser curativos, pero en las etapas posteriores tan solo consiguen retrasar su progresión, lo cual pone de manifiesto la necesidad de diseñar una técnica de detección precoz. El objetivo del proyecto PROTOCLIN (Improvement of tools and portability of mass spectrometry-based clinical proteomics as applied to chronic kidney disease), financiado por la UE, era promover la electroforesis capilar combinada con la espectrometría de masas (CE-MS) para hallar biomarcadores de la IRC. A fin de permitir su movilidad, se creó la plataforma CE-MS en el laboratorio de un socio. Dado que este enfoque requería comparabilidad entre los grupos de datos, se emplearon aplicaciones informáticas que permitían el intercambio y la comparación de la información obtenida con diversas técnicas. Los ensayos de validación confirmaron la transferibilidad y la precisión tanto de la plataforma como del programa informático. Se realizó una evaluación adicional de la plataforma CE-MS comparándola con la cromatografía líquida (LC-MS) usando muestras de orina estándar. El análisis mostró claramente que CE-MS tiene mayor reproducibilidad, atribuida a la calibración del tiempo de migración de los péptidos y la eliminación de los efectos de traspaso. Todos los socios coordinaron actividades de formación sobre todas las plataformas disponibles de espectrometría de masas. Se establecieron protocolos y procedimientos estándar para el procesamiento de orina en todos los laboratorios. La plataforma CE-MS se caracterizó en cuanto a su rendimiento analítico para afianzar aún mejor la comparabilidad de distintos sitios. Una cuestión muy relevante para el análisis de biomarcadores en la orina es la cuantificación y el análisis comparativo, lo cual requiere la normalización de los datos. Para cumplir estos requisitos, los socios desarrollaron software de normalización y cuantificación de las señales de CE-MS en referencia a normas internas. En conclusión, los socios del proyecto demostraron que los biomarcadores proteómicos urinarios proporcionan información clínica para la detección precoz y el diagnóstico diferencial de la IRC, evitando además el uso de técnicas invasivas. Ello supone una clara ventaja a favor de la aplicación de biomarcadores proteómicos de la IRC en la orina, en un formato de cribaje de alto rendimiento.

Palabras clave

Enfermedad renal crónica, detección precoz, PROTOCLIN, espectrometría de masas, biomarcadores proteómicos

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