Una prueba para detectar E. coli en condiciones de trabajo de campo
Aproximadamente el 10% de las E. coli son lactosa negativas y no se reflejan en el recuento si la técnica utilizada sólo identifica colonias lactosa positivas. Para dar una solución a estos problemas, el proyecto ANTRES desarrolló un procedimiento sencillo y económico para la identificación de la E. coli en condiciones de trabajo de campo. Esta prueba detectó la enzima Beta-D-glucuronidasa utilizando el sustrato 4-metilumbeliferil-Beta-D glucurónido (MUG), que produce el compuesto 4-metilumbeliferona. Una fuerte fluorescencia azul bajo los rayos UVA indicó que el resultado era positivo. Es importante detectar la enzima debido a que la producen prácticamente todas las cepas de E. coli. Es más, el resto de bacterias que producen la enzima no crecen en medios como los que se utilizan para la E. coli. La prueba desarrollada por el proyecto ANTRES resultó mucho más económica que las ya existentes, basadas en el uso de medios de cultivo con MUG añadido. El uso de placas microtiter permitió analizar muchas cepas de forma rápida y sencilla. La técnica resultó adecuada en condiciones de trabajo de campo. Una de las principales ventajas del nuevo método es que reduce sustancialmente el número de falsos positivos. La prueba permitió identificar con precisión la E. coli entre las distintas colonias fermentadoras de lactosa. En los ensayos prácticos realizados en Bolivia y Perú se llevó a cabo la prueba con MUG para varias colonias de coliformes atípicas. El resultado fue una mejora sustancial en la capacidad del personal local de laboratorio para clasificar cepas aisladas cultivadas en placas de agar McConkey.
