Molecole di trasporto superefficienti
Nel settore delle terapie genetiche, l'efficacia dell'apporto funzionale di materiale genetico nella cellula è essenziale. In realtà, le biomolecole con funzione di trasporto devono essere trasferite nella cellula nel punto dove devono svolgere la loro funzione. I CPP (Cell Penetrating Peptides) sembrano svolgere in maniera particolarmente efficace un ruolo di trasporto di molecole idrofile nelle cellule viventi a scopo terapeutico. Senza i problemi intrinseci legati all'uso di virus, i CPP sembrano la risposta biomolecolare per l'apporto di queste molecole curative. I partner consorziati nell'ambito del progetto CPP hanno cercato di ovviare a un inconveniente che questa tecnica ha mostrato in ricerche precedenti. Il problema riguarda la maniera con cui isolare i CPP più efficaci utilizzando l'HTS (High Throughput Screening), uno screening a elevate prestazioni. Il team ha sperimentato proteine fluorescenti marcate tramite i segnali che emettono. La procedura richiedeva l'eliminazione della luminescenza di peptidi non incorporati per identificare le molecole che erano state incorporate. Un altro metodo di screening era basato sul monitoraggio di peptidi non marcati. Quando sono stati incorporati, questi sono stati identificati tramite coloranti fluorescenti. In un'estensione dell'ambito di lavoro, è stato utilizzato il processo di biotinilazione per identificare i CPP più idonei per il trasporto. La biotinilazione sfrutta le proprietà leganti della biotina marcata con bianco d'uovo. Di conseguenza, i carichi formavano un complesso con CPP marcato con biotina e bianco d'uovo. Tutte le proteine intracellulari, quindi, sono state quantificate utilizzando un marcatore, un tracciante fluorescente o un'attività enzimatica. Sono state pianificate nuove ricerche con il campione basato su enzimi (Cre-ricombinasi) nei topi reporter per accertare la specificità dell'apporto di CPP. La capacità dei CPP di trasportare efficacemente molecole terapeutiche nelle cellule rappresenta un potenziale eccezionale per l'industria biofarmaceutica.
